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Niveles de susceptibilidad a flumetrina y fluvalinato y detección de mutaciones asociadas a la resistencia a piretroides en Varroa destructor, en Uruguay

Trabajo presentado en el IX Encuentro Biólogos en Red 2014. Mar del Plata, Noviembre 2014.

Autores

Mitton, Giulia Angelica (1,5); Giménez Martínez, Pablo (1); Quintana, Silvina (2); Mendoza,

Yamandú (3); De Piano, Fiorella (4,6); Eguaras, Martín (1,5); Maggi, Matías Daniel (1,5); Ruffinengo, Sergio Roberto (4)

 

(1) Centro de investigación en abejas sociales (CIAS). E-mail: giumitton@gmail.com. Laboratorio de Artrópodos, Facultad de Ciencias Exactas y Naturales, Universidad Nacional de Mar del Plata.

(2) Laboratorio de Biología Molecular de Fares Taie Instituto de Análisis, Mar del Plata.

(3) INIA La Estanzuela, Departamento Colonia, Uruguay.

(4) Apicultura. Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad Nacional de Mar del Plata, Unidad Integrada Balcarce.

5- CONICET, Consejo Nacional
de Investigaciones Científicas y Técnicas.

6- Comisión de Investigaciones Científicas (CIC).

Introducción

La varroosis es el mayor problema sanitario de la apicultura mundial. Su control es
altamente dependiente de la aplicación de acaricidas de síntesis. Entre los más utilizados
se encuentran los piretroides, flumetrina y fluvalinato. El uso indiscriminado e incorrecto
de estos principios activos produjo una fuerte presión de selección sobre diferentes
poblaciones de ácaros, generando la aparición de focos de resistencia en distintos lugares
del mundo. Los objetivos de este estudio fueron: i) evaluar niveles de susceptibilidad a
fluvalinato y flumetrina en poblaciones de ácaros de apiarios ubicados en el Departamento
Colonia, Uruguay; y, ii) detectar mutaciones asociadas a la resistencia a esos acaricidas.
Se prepararon concentraciones crecientes de flumetrina y fluvalinato en hexano, de 0
(control) a 20 μg/ml, que fueron volcadas en cápsulas de Petri. Una vez evaporado el
hexano, en cada cápsula se agregaron 5 hembras de Varroa. Una hora después, se
incorporaron 3 abejas, candy (azúcar en polvo y agua, 3:1) y agua. A las 24 hs, se registró
la mortalidad de ácaros para cada concentración y se estimaron las CL50
(Concentraciones de acaricidas que produjeron la muerte del 50% de los ácaros
expuestos a la droga). Los ácaros (vivos y muertos) se utilizaron para los estudios
moleculares. Así, se amplificó por PCR en tiempo real, una región del dominio
transmembrana del canal de sodio activado por voltaje y se analizó por High Resolution
Melting (HRM) y secuenciación. Se observó un incremento de 12.6 veces en la CL50
obtenida para flumetrina, en comparación con la CL50 para ácaros susceptibles. Se
detectó la mutación L925V, asociada a la resistencia a piretroides (sustitución de una
leucina por una valina en el dominio IIS5 del gen del canal de sodio). Este estudio
constituye el primer reporte de resistencia a piretroides en Uruguay y un aporte
significativo para la determinación de la base genética de la resistencia a acaricidas de
síntesis, en poblaciones de ácaros en este país.

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