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Puesta a punto de una PCR en Tiempo Real para diferenciar Brucella abortus S19 de Brucella abortus cepa de campo.

Autores

Recavarren, M.1*, Quintana, S.2 y Fiorentino, A.3

(1) División Veterinaria y (2) Área Biología Molecular de Fares Taie Instituto de Análisis (3) EEA INTA Balcarce.  

Objetivos

El objetivo del presente trabajo fue poner a punto una técnica de PCR en Tiempo Real para detectar ADN de las cepas vacunal (S19) y de campo (CC) de B. abortus, a partir de cultivos puros y de sueros de vaquillonas vacunadas. 

Metodología

1) Pruebas de aglutinación en placa (BPA) y tubos (SAT y 2-ME) y Polarización de Fluorescencia (FPA) de sueros de vaquillonas vacunadas fuera de la época requerida. 

2) Extracción, cuantificación y amplificación del ADN de Brucella Abortus por PCR en Tiempo Real de:  

  • cultivos puros de Brucella S19 y CC 
  • suero de bovinos positivos a brucelosis (N=14) 
 

Conclusiones 

• Mediante esta técnica se logró amplificar el ADN de B. abortus a partir de cultivos
puros de las cepas S19 y CC, con una sensibilidad > 0,05 ng de ADN.
• De las 14 muestras de bovinos positivos a brucelosis, 4 resultaron positivas para CC, 4 positivas para S19 y 6 positivas para ambas cepas por PCR. Esto último podría indicar que habría coexistencia de ambas cepas en el momento del muestreo.
• La PCR en Tiempo Real es una técnica de biología molecular que podría ser de gran utilidad para diferenciar animales vacunados de infectados. 
 
 
Brucella  

 

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